Sadržaj

• Kročiti
• Dio 1 od 2: Provjera kalibracije
• Dio 2 od 2: Izračunavanje rezultata

Pipeta je vrsta laboratorijske opreme koja se koristi za mjerenje i prijenos vrlo malih količina tekućine. Točnost i preciznost u mjerenju pipete neophodni su jer svako odstupanje u isporučenim količinama može utjecati na rezultate pokusa. Da biste osigurali točnost, potrebno je provjeravati kalibraciju pipete svakih nekoliko mjeseci. Proces kalibracije pomaže provjeriti daje li oprema točnu količinu kako bi se mogla obnoviti ako nije.

Kročiti

Dio 1 od 2: Provjera kalibracije

1. Skupite potrebne materijale. Da biste provjerili kalibraciju pipete, trebaju vam pipeta, vrhovi pipeta, destilirana voda, čaša, termometar, vaga i posuđe. Vaga mora biti mikrogram specifičan za kalibriranje mikropipeta s najviše 1 µl.
   • Ne treba vam više od 5 ml vode. Napunite šalicu vodom.
   • Provjerite odgovaraju li vrhovi pipete.
2. Izmjerite temperaturu destilirane vode. Stavite termometar u vodu i pustite da odstoji barem jednu minutu. Ako se crvena crta na termometru i dalje pomiče, ostavite je još minutu. Nakon minute zapišite temperaturu u bilježnicu. Uklonite termometar i osušite ga kad završite.
   • Temperatura vode je važna za izračune kako bi se provjerila kalibracija.
3. Stavite vagu na vagu i postavite je na nulu. U idealnom slučaju koristite vagu s vratima i izoliranu sobu. Stavite posudu u sobu i zatvorite vrata. Ako nema vrata, samo stavite posudu na vagu. Pritisnite gumb "Nula" ili "Tara" i pričekajte da vaga očita nulu.
   • Postavljanjem vage na nulu ne uzima se u obzir težina plastične posude i postaje moguće izmjeriti samo težinu onoga što stavite u posudu.
4. Pripremite pipetu za kalibraciju. Prije početka obrišite pipetu etanolom kako biste ubili nečistoće - uz to pazite da se vrh pipete ne začepi. Postavite ispravan vrh na kraj i podesite glasnoću koju želite testirati.
   • Prije kalibracije testirate i najmanji i najveći volumen koji pipeta može izdati.
5. Isperite vrh prije kalibriranja. Pritisnite gumb do prvog zaustavljanja i umetnite vrh u destiliranu vodu tako da je oko 2 mm uronjeno u tekućinu. Otpustite gumb da biste ispraznili malo tekućine, a zatim ponovno nalijte tekućinu pritiskom na gumb. To ponovite tri puta da biste isprali vrh.
   • Pritisnite gumb do drugog graničnika kako biste napunili tekućinu koja je ostala u vrhu i izvadili pipetu iz vode.
6. Nacrtajte kalibracijski volumen. S vrhom iz tekućine, pritisnite gumb dolje do prvog zaustavljanja. Stavite oko 2 mm od vrha u destiliranu vodu i otpustite gumb kako biste povukli tekućinu u vrh. Pričekajte oko sekunde prije nego što izvadite vrh iz vode.
   • Provjerite je li vrh potpuno uronjen tijekom cijelog postupka aspiracije. Ne želite mjehuriće na vrhu ili rezultat neće biti u redu.
7. Dozirajte tekućinu u posudu na vagi. Stavite vrh na dno posude i pritisnite gumb do prvog zaustavljanja. Pomaknite se na drugo mjesto, malo dalje od vode, i pritisnite gumb do drugog zaustavljanja. Držite pritisnutu tipku i podignite vrh zdjele.
   • Držite vrh na pipeti jer ćete ga ponovno koristiti za obavljanje dodatnih testova kalibracije. Pazite da vrh ne dodiruje ništa.
8. Zabilježite težinu koja označava vagu. Zatvorite vrata ako koristite vagu u izoliranoj sobi. Pričekajte da se vrijednosti prestanu mijenjati. Zabilježite ovu vrijednost u svoju bilježnicu.
   • Važno je pričekati da se broj stabilizira prije nego što ga zapišete. Vaša će očitanja biti pogrešna ako ne pričekate.
9. Ponavljajte ovaj postupak dok ne napravite najmanje 10 mjerenja. Postavite ravnotežu na nulu, isperite vrh, izvucite istu količinu, podijelite glasnoću i zatim zabilježite težinu. Trebate više snimaka iste glasnoće, a zatim možete uzeti prosjek svih snimki zajedno.
   • Taj isti postupak možete ponoviti s različitim volumenima, pod uvjetom da napravite više mjerenja po volumenu.

Dio 2 od 2: Izračunavanje rezultata

1. Upotrijebite formulu za izračunati volumen. Formula za izračunavanje volumena koji dostavlja pipeta je V = w * Z, gdje je w težina vode, Z je pretvorbeni faktor zasnovan na gustoći vode, a V izračunati volumen koliko vode tamo se predaje.
   • Varijablu Z možete pronaći tako što ćete potražiti gustoću vode koristeći temperaturu zabilježenu na početku eksperimenta.
   • Na primjer: Ako je temperatura vode bila 23 ° C, pretpostavljate Z vrijednost od 1,0035 µg / mg.
2. Izračunajte srednju vrijednost ponovljenih ispitivanja. Sigurno ste barem 10 puta izvagali količinu vode koju ste ispustili pipetom. Da biste izračunali srednju vrijednost svih ovih vrijednosti, zbrojite ih i podijelite s 10. Ako ste napravili manje ili više pokusa, dodajte svaki pokus i zbroj podijelite s ukupnim brojem pokusa.
   • Na primjer: Deset utega koje ste registrirali za zapreminu pipete od 10 μl su kako slijedi: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 i 9,98.
   • Srednja vrijednost je: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Primijenite varijable na jednadžbu i riješite je. Nakon što odredite ispravne vrijednosti za svaku varijablu, možete ih ugraditi u jednadžbu i riješiti izračunati volumen. Da biste to riješili, jednostavno pomnožite prosječnu težinu svih test vrijednosti s Z vrijednošću.
   • Na primjer: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
4. Izračunajte točnost pipete. Za izračunavanje točnosti možete koristiti jednadžbu A = 100 x V._prosj/ V₀ gdje je A preciznost pipete, V._prosj srednji izračunati volumen i V.₀ vrijednost koju ste postavili za pipetu. Točnost mora biti između 99-101%.
   • Ako je pipeta pravilno kalibrirana, izračunata vrijednost trebala bi biti vrlo blizu stvarnoj vrijednosti koju ste postavili na pipeti.
   • Na primjer: A = 100 x V_prosj/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Ova je pipeta pravilno kalibrirana.
5. Pošaljite pipetu na kalibraciju, ako je potrebno. Ako vaša pipeta ne uspije na kalibracijskom testu, odmah je prestanite koristiti za eksperimente. Pipete su vrlo osjetljivi i skupi dijelovi laboratorijske opreme. Kalibraciju ne možete sami popraviti, pa ćete je morati poslati na pravilno održavanje. Neke će tvrtke doći u vaš laboratorij i tamo kalibrirati vaše pipete.
   • Za održavanje kontaktirajte tvrtku koja proizvodi vašu marku pipete.